靶向沉默 miR-345表达对胃癌细胞周期的影响及其机制

• 作者: 叶丽芳 李博 杨夏彤 柳勤译 王丽萍 王伟福 蔡少薇 许鸣 郭婉薇 陈晓武 马俊
• 来源期刊: 胃肠病学和肝病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA 胃癌 细胞周期 miR-345
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著? 胃相关疾病
• 页码范围: 398-401
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2
• 字数: 3594字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5709.2015.04.009

摘要

目的：探讨miR-345影响胃癌细胞生长周期的作用机制。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45以沉默miR-345表达，采用实时英光定量PCR（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹（Western blotting）检测胃癌细胞中p21 Cip1水平，随后检测CDK4、CDK6、Cyclin D1、p-Rb、Rb蛋白水平，进一步克隆形成实验比较其增殖能力，流式细胞术检测miR-345对胃癌细胞周期的影响。结果脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45可以抑制miR-345的表达；p21Cip1的mRNA和蛋白水平在低miR-345表达的胃癌细胞系中升高；下调miR-345的表达后MGC803、MKN45细胞中CDK4、CDK6、Cyclin D1和总Rb蛋白的表达水平无明显变化，但Rb蛋白的磷酸化水平显著降低。结论沉默miR-345的表达能够明显阻滞胃癌细胞从G1期向S期的进程，减慢细胞生长速度；其机制与上调p21 Cip1进而抑制Rb蛋白的磷酸化有关。