重组猪瘟病毒C株E2蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒的构建及鉴定

• 作者: 周艳君 夏天奇 姜一峰 曲泽慧 李丽薇 杨莘 虞凌雪 郑海红 高飞
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 重组病毒 E2蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4782字
• 语种: 中文

摘要

本研究在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)弱毒株(HuN4-F112)感染性克隆的基础上,在其基因组ORF1b和ORF2之间插入(classical swine fever,CSF)疫苗毒C株的E2基因,并在E2基因3'端下游插入PRRSV的转录调控序列6(transcription regulatory sequence 6,TRS6),构建成重组全长感染性克隆(pA-C-E2).用Swa Ⅰ线性化该质粒,并体外转录后,将RNA转染MARC-145细胞并传代1次,即可拯救出重组病毒vA-C-E2,在至少20代的传代过程中能够保持遗传稳定性.重组病毒与亲本病毒vHuN4-F112在病毒滴度、空斑形态、蛋白表达等方面没有明显差异;多步生长曲线结果显示,该重组病毒与亲本毒具有相似的生长特性.间接免疫荧光(indirect immunofluorescence,IFA)结果显示,重组病毒不仅能够表达PRRSV N蛋白,也可以表达猪瘟病毒E2蛋白.本研究结果为研制CSF和PRRS新型基因重组疫苗奠定了坚实物质基础.