重组蛋白 PTD-HSP27的制备及其穿细胞膜和角膜组织的功能研究

• 作者: 余榕捷 刘莲 季青山 戴云 曾智星 郭晓令 钟敬祥
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白转导域 热休克蛋白27 反式转录激活因子 晶状体上皮细胞
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 135-140
• 页数: 6页
• 分类号: R363|R77
• 字数: 4620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.01.026

摘要

目的：制备PTD-HSP27蛋白并研究其能否穿过人晶状体上皮细胞SRA01／04细胞膜及新西兰大白兔的角膜组织进入眼前房。方法：利用重叠延伸PCR法获得重组目的基因片段PTD-HSPB1-6His，构建重组质粒pKYB-PTD-HSP27-6His，原核诱导PTD-HSP27蛋白表达及纯化重组蛋白后对其进行Western blotting鉴定；用异硫氰酸荧光素（ FITC）标记重组蛋白PTD-HSP27并检测其穿透SRA01／04细胞膜的能力及兔眼角膜组织的能力。结果：成功构建并纯化制备目的蛋白PTD-HSP27，在PTD-HSP27孵育后的SRA01／04细胞及结膜囊滴注PTD-HSP27兔眼前房内均可检测出重组蛋白PTD-HSP27。结论：通过重叠延伸PCR法及镍柱层析纯化法可以获得较纯的重组蛋白PTD-HSP27；重组蛋白PTD-HSP27能够穿透SRA01／04细胞膜及穿越兔眼角膜进入房水。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴云	暨南大学生物工程研究所	31	155	8.0	11.0
2	钟敬祥	暨南大学附属第一医院眼科	49	150	6.0	8.0
3	刘莲	暨南大学附属第一医院眼科	15	55	5.0	6.0
4	余榕捷	暨南大学生物工程研究所	37	174	6.0	12.0
5	曾智星	暨南大学生物工程研究所	2	5	1.0	2.0
6	郭晓令	暨南大学生物工程研究所	6	13	2.0	3.0
7	季青山	暨南大学附属第一医院眼科	4	23	2.0	4.0