肝窦内皮细胞的分离培养及体外生长规律的观察

• 作者: 吕文良 张莎莎 徐晨光 李娟梅 杨佼
• 来源期刊: 中华生物医学工程杂志
• 关键词: 肝窦 内皮细胞 细胞培养技术 细胞鉴定 显微镜检查,原子力
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-25
• 页数: 6页
• 字数: 4785字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2015.01.004

摘要

目的：建立大鼠肝窦内皮细胞（SEC）的分离培养的方法，观察SEC体外培养的生长特点。方法通过门静脉插管进行胶原酶原位灌注，结合离体消化、Percoll密度梯度离心法分离SEC；应用Ⅷ因子和CD14间接免疫荧光法观察SEC表面分子的表达进行细胞鉴定；应用光学显微镜、电子显微镜、并首次使用原子力显微镜（AFM）观察体外培养状态下SEC的超微结构及形态学变化。结果 SEC获得率为每只大鼠（2.95±0.31）×107，细胞活力好。免疫荧光法鉴定CD14阳性率约达99%，Ⅷ因子相关抗原抗体阳性率约为2%。光学显微镜下观察，细胞形态变化典型，并持续增殖。电子显微镜下观察到细胞典型的由成簇窗孔组成的筛板样结构；AFM下实现了对SEC的三维结构的观察，细胞骨架清晰。结论高纯度、活力好的SEC的成功培养及体外生长规律的观察，为研究SEC在肝脏生理病理过程中作用提供了前提条件。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨佼	中国中医科学院广安门医院肝病科	27	124	5.0	10.0
2	吕文良	中国中医科学院广安门医院肝病科	107	648	14.0	22.0
3	李娟梅	中国中医科学院广安门医院肝病科	19	118	6.0	10.0
4	张莎莎	浙江湖州市第一人民医院中医科	4	5	1.0	2.0
5	徐晨光	宁夏回族自治区人民医院中医科	2	11	2.0	2.0