同源重组整合 vgb 基因提升枯草芽孢杆菌亚麻脱胶能力

• 作者: 丁若篧 张兴群 张懿翔 郁崇文 陈婷
• 来源期刊: 中国麻业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 生物脱胶 果胶酶 枯草芽孢杆菌 vgb 基因 同源重组
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 原料生产?生态环保
• 页码范围: 87-94
• 页数: 8页
• 分类号: Q789
• 字数: 3909字
• 语种: 中文

摘要

【目的】将透明颤菌血红蛋白（VHb）基因（vgb）在枯草芽孢杆菌中进行整合表达，以改善枯草芽孢杆菌的呼吸强度，通过高密度培养提高果胶酶的表达量，最终明显改善脱胶效果。【方法】构建含有 vgb 基因、amyE 基因以及启动子 P43的 pSK －vgb （＋）质粒，通过同源重组的方法，将 vgb 基因整合到枯草芽孢杆菌 A5的染色体上，得到稳定表达透明颤菌血红蛋白的枯草芽孢杆菌 A5－vgb （＋）。分别采用 PCR 和 CO 差光谱分析法检测 vgb 基因的整合状态与血红蛋白的稳定表达，并通过发酵摇瓶试验研究 VHb 对菌株果胶酶产量的影响。将构建好的 A5－vgb （＋）菌株进行脱胶试验，通过 XRD 结晶度与电镜扫描分析鉴定脱胶效果。【结果】PCR 与 CO 差光谱检测表明，vgb 基因成功整合在 A5菌株中，且正确表达的 VHb 具有生物学活性，在150 rpm，37℃，pH ＝8.0，16小时发酵的条件下，vgb 基因的表达促使 A5－vgb （＋）菌株的果胶酶产量较不含 vgb 基因的菌株提升了29.5％。XRD 与电镜扫描结果表明，构建的 A5－vgb （＋）菌株的脱胶效果相较于不含 vgb 的菌株，在结晶度上提高了0.55％，表面更光滑。【结论】将 vgb 基因整合至枯草芽孢杆菌 A5菌株中，可提高 A5菌株的脱胶效果。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郁崇文	东华大学生态纺织教育部重点实验室	232	1522	20.0	26.0
10	陈婷	东华大学生态纺织教育部重点实验室	41	135	7.0	10.0
11	张懿翔	东华大学生态纺织教育部重点实验室	1	8	1.0	1.0
12	丁若篧	东华大学生态纺织教育部重点实验室	1	8	1.0	1.0