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活细胞荧光探针法实时检测细胞内活性氧与细胞凋亡
活细胞荧光探针法实时检测细胞内活性氧与细胞凋亡
作者:
付欣
周问渠
彭燕
李冰
李熹翀
洪玮
邓小亮
邹东霆
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
活性氧
细胞凋亡
活细胞工作站
活细胞荧光探针
摘要:
目的:建立能利用活细胞工作站和荧光探针动态监测细胞内活性氧(ROS)与细胞凋亡的新方法。方法将人支气管上皮细胞16HBE和肺癌A549细胞分别以工作浓度为5μmol/L的ROS活细胞荧光探针C10422和C10444、10 mg/L的线粒体功能探针JC?1孵育30 min、凋亡指示探针AnnexinV/PI孵育15 min后,用活细胞工作站连续记录1 mmol/L H2O2刺激时的特定波长荧光灰度值,评价细胞ROS,线粒体膜电位以及细胞凋亡指数。结果16HBE细胞在1mmol/L H2O2持续刺激下,ROS荧光探针C10422和C10444表现为特定波长灰度值持续增加,分别在80 min后和10 min后ROS水平明显升高(均P<0.05);线粒体膜电位荧光探针JC?1表现为两种波长荧光灰度值的转化,在H2O2持续刺激下,代表细胞线粒体功能的指标R/G比例在20 min以后明显下降(P<0.05);凋亡探针AnnexinV主要表现在细胞膜区域荧光聚集增强,但整体视野的荧光灰度变化不明显。A549细胞在相同的实验条件下1 mmol/L H2O2刺激时,ROS水平也升高但低于16HBE(P<0.05);而JC?1所探测的R/G比值曲线出现一个持续的下降峰后又部分回升。结论以活细胞工作站为基础结合活细胞荧光探针建立的检测方法能更客观地反映细胞的氧化应激行为和细胞凋亡状态。
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文献信息
篇名
活细胞荧光探针法实时检测细胞内活性氧与细胞凋亡
来源期刊
中华生物医学工程杂志
学科
关键词
活性氧
细胞凋亡
活细胞工作站
活细胞荧光探针
年,卷(期)
2015,(1)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
8-13
页数
6页
分类号
字数
4642字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2015.01.002
五维指标
作者信息
序号
姓名
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1
李熹翀
510182广州医科大学实验医学研究中心
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彭燕
510182广州医科大学实验医学研究中心
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邓小亮
510182广州医科大学实验医学研究中心
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付欣
510182广州医科大学实验医学研究中心
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周问渠
510182广州医科大学实验医学研究中心
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洪玮
510182广州医科大学实验医学研究中心
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邹东霆
510182广州医科大学实验医学研究中心
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李冰
510182广州医科大学实验医学研究中心
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活细胞工作站
活细胞荧光探针
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研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
中华生物医学工程杂志
主办单位:
中华医学会
广州医科大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1674-1927
CN:
11-5668/R
开本:
大16开
出版地:
广州市番禺区新造镇广州医科大学新造校区
邮发代号:
46-190
创刊时间:
1995
语种:
chi
出版文献量(篇)
3731
总下载数(次)
14
总被引数(次)
9495
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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