探针熔解曲线法快速检测结核分枝杆菌注射类二线药耐药突变

• 作者: 付军 卢锦标 张婷 李庆阁 杨蕾 王国治 许晔 陈保文
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 注射类二线药 耐药突变 探针熔解曲线法
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 412-417
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 字数: 5591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.05.005

摘要

目的 评价结核分枝杆菌注射类二线药耐药突变检测试剂盒MehPro TB/SL的分析性能以及临床性能.方法 首先使用企业参考品对试剂盒的突变检出能力进行考察,之后将野生型基因组DNA以10倍梯度稀释后考察试剂盒的最低检测限,使用野生型质粒以及含常见耐药突变的质粒以不同突变比例混合考察试剂盒检测不均一耐药样本的能力,并使用23株非结核分枝杆菌标准株考察试剂盒的分析特异性,最后使用241份临床分离株对试剂盒进行临床评价.结果 该试剂盒可以将9种耐药相关突变与1种野生型多态性与野生型进行区分.可以检测到低至5个拷贝的野生型基因组DNA.当突变比例为30％或更高时,试剂盒可以将其与野生型进行区分.23种非结核分枝杆菌的结果显示该试剂盒有良好的特异性.和比例法药敏试验进行对比,该试剂盒的临床灵敏度为卡那霉素90.0％(9/10),阿米卡星80.0％(8/10),卷曲霉素85.7％(6/7);特异性为卡那霉素98.8％(85/86),阿米卡星98.8％(85/86),卷曲霉素96.6％(86/89).试剂盒检测结果与测序结果一致.结论 该试剂盒灵敏度高、特异性好,可以快速、准确地检测结核分枝杆菌注射类二线药常见的耐药突变,有望应用于临床.