MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响

• 作者: 吕建新 张小勤 张柳 施孟如 李伟 杨宇 章万林 陈琳
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: MFRN1 稳定转染 线粒体功能 活性氧 能量代谢
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 809-817
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2015.06.0166

摘要

Mitoferrin-1 (MFRN1)是溶质携带蛋白家族的一员,是线粒体内膜上最主要的铁运输蛋白.为了观察MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响,采用包装慢病毒和感染293T细胞的方法构建MFRN1稳定过表达的细胞模型(293T-MFRN1),并对其线粒体功能进行评价.构建的稳定细胞株293T-MFRN1中MFRN1转录水平及蛋白表达水平显著增加(P＜0.01),MFRN1过表达细胞线粒体内总铁的含量明显增加(P＜0.05);电镜显示线粒体结构损伤,线粒体嵴减少、空泡化;线粒体能量代谢受抑制,细胞ATP含量显著下降,腺苷酸池总量(ATP+ADP+AMP)比对照组减少约40％;细胞生长受到抑制,在细胞培养48 h后高表达组细胞数量显著低于对照组;细胞内羟自由基(·OH)含量增加;线粒体DNA发生明显的氧化损伤.以上表明,MFRN1表达量的稳定对细胞功能极为重要,表达量异常增加将导致细胞线粒体功能障碍、细胞增殖抑制.