反向PCR精确定位人结肠癌SW480细胞CD133基因启动子区脱氧核糖核酸酶Ⅰ高敏感位点

• 作者: 李振华 李耀平 郭凯庆
• 来源期刊: 肿瘤研究与临床
• 关键词: 结肠肿瘤 反向PCR 脱氧核糖核酸酶Ⅰ 转录启动子
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 79-81,90
• 页数: 4页
• 字数: 2927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2015.02.002

摘要

目的 利用反向PCR法精确定位人结肠癌SW480细胞CD133基因启动子区对脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase Ⅰ)酶切敏感的位点.方法 提取SW480细胞的细胞核,以10 U/ml DNase Ⅰ处理细胞核10 min.反向PCR扩增:提取基因组,用限制性内切酶EcoR Ⅰ和Xmal Ⅰ片段化基因组,末端补平,T4连接酶连接,利用反向PCR后对产物测序,靠近限制性内切酶位点的序列即DNase Ⅰ的切割位点.结果 CD133基因转录起始点上游9个DNase Ⅰ高敏感位被鉴别出,它们位于第一个外显子-700 ～-300 bp碱基区域内.结论 用反向成环PCR技术可以精确测定DNase Ⅰ的剪切位点,这些位点聚集在一个特定的区域内.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李振华	山西省肿瘤研究所免疫室	3	3	1.0	1.0