埃及伊蚊galectin12基因的克隆、表达及杀虫活性测定

• 作者: 关雄 刘健楠 孙振裕 张灵玲 胡小华 陈倩倩 黄鲜晖
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 埃及伊蚊 克隆 表达 galectin12
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1472-1477
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.11.010

摘要

凝集素属于β-半乳糖苷结合蛋白家族,广泛存在于昆虫的体内,对其免疫调控起重要作用,研究埃及伊蚊(Aedes aegypti)中的凝集素具有重要理论意义.本研究以埃及伊蚊凝集素galectinJ12基因序列设计引物,通过qRT-PCR扩增获得埃及伊蚊凝集素galectin12基因片段,将其连接到pMD-18T克隆载体,筛选阳性克隆子进行酶切以及测序验证,根据酶切位点将目的基因片段连接到pET-32a载体进行原核表达,获得23 kD的目的蛋白,并采用His酶亲和层析技术对目的蛋白进行纯化,获得纯化蛋白,并进行生物活性测定,结果表明,Galectin12能够抑制Bt对蚊虫的毒力.研究结果为进一步验证凝集素参与埃及伊蚊抵御Bt Cry毒素过程的机理奠定分子基础.