应用Talen法制备apoE基因敲除大鼠模型

• 作者: 于洋 周生来 张婀娜 张梅英 徐影琪 李晓晶 杨葳 王惟 赵文
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 转录激活因子样效应因子核酸酶(Talen) 载脂蛋白E(ApoE) 基因敲除 大鼠
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 277-282
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2015.04.003

摘要

目的 应用转录激活因子样效应因子核酸酶(Talen)法制备载脂蛋白E(apoE基因敲除大鼠模型,为进一步研究apoE基因功能,动脉粥样硬化(AS)疾病发病机制及治疗方法奠定基础.方法 设计并合成针对大鼠apoE基因的Talen序列,应用原核显微注射方法制备子代鼠.通过PCR-测序及TA克隆-测序法检测仔鼠中apoE的突变,经传代及兄妹交配获得纯合型仔鼠,并对其基因型进行鉴定.应用Western blot方法检测apoE/-仔鼠各组织中ApoE蛋白表达水平;血清学分析血脂总胆固醇(CHO)及-甘-油三酯(TG)含量;应用RT-PCR方法检测脂质代谢相关基因三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达.结果 经鉴定选取在第二外显子处缺失1bp,造成开放阅读框移码突变的大鼠为阳性F0代仔鼠,该鼠经传代及筛选,最终获得apoE-/-大鼠.Western blot检测显示apoE-/-鼠在心、肝、肾、脑、卵巢组织中未见ApoE蛋白的表达,表明在该模型中成功实现了apoE基因的敲除.apo,E-/-鼠血脂CHO、TG均高于野生SD大鼠,其中CHO水平呈现显著性差异(P＜0.05).在apoE-/-鼠肝组织中ABCA1的表达降低,可能起到促进AS形成的作用.结论 应用Talen法成功制备apoE基因敲除SD大鼠;经筛选获得了纯合型apoE-/-大鼠,该模型实现了apoE 基因敲除,并表现为高血脂及AS性状.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张梅英	中国医科大学实验动物部	41	186	7.0	12.0
2	王惟	中国医科大学实验动物部	15	25	3.0	4.0
3	于洋	中国医科大学实验动物部	43	106	5.0	6.0
4	周生来	中国医科大学实验动物部	19	35	4.0	5.0
5	杨葳	中国医科大学实验动物部	29	100	6.0	8.0
6	徐影琪	中国医科大学实验动物部	3	3	1.0	1.0
7	赵文	中国医科大学实验动物部	11	6	1.0	1.0
8	张婀娜	中国医科大学实验动物部	8	3	1.0	1.0
9	李晓晶		1	0	0.0	0.0