抗噬菌体甲型副伤寒沙门菌突变菌的构建及其生物学特性

• 作者: 冯梦蝶 宋武战 杨洪文 毛小萍 毛普加 洪愉 许泽仰 赵继华 黄芬
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型副伤寒沙门菌 突变菌 同源重组 生物学特性 噬菌体抗性
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 275-281
• 页数: 7页
• 分类号: R378.22
• 字数: 4019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20150213

摘要

目的:采用同源重组基因敲除方法构建3株甲型副伤寒沙门菌(副甲)抗噬菌体突变菌,并研究其生物学特性.方法:通过PCR和融合PCR方法获得了2、3、5号同源臂片段,经酶切后与pYG4载体连接,构建pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重组质粒.经PCR测序鉴定正确后,与野生型副甲菌进行同源重组,获得2、3、5号3株抗噬菌体突变菌.将3株突变菌和野生型副甲菌经不同种类和浓度的抗生素、不同pH值和温度及不同浓度的盐离子处理后,测量菌株的A595值,分析3株突变菌对抗生素、温度、pH值和盐离子的敏感性以及生长曲线.结果:PCR和融合PCR扩增出3个同源臂,构建的pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重组质粒经PCR测序表明构建成功;同源重组和抗噬菌体验证表明成功获得3株抗噬菌体突变菌.3株突变菌产生了卡那霉素抗性,且对链霉素表现出敏感性;2号菌表现出氨苄青霉素抗性,5号菌表现高温度耐受性;与野性型副甲菌比较,3株突变菌的生长曲线明显平缓,尤以2号突变菌最为突出.结论:成功构建抗噬菌体突变菌,并获得一些特殊的生物学特性.