小鼠脑脊髓炎病毒 RT-PCR 方法的建立及初步应用

• 作者: 付瑞 卫礼 岳秉飞 李晓波 王吉 王淑菁 贺争鸣
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Theiler氏脑脊髓炎病毒 GDVII 脑腔接种 逆转录-聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: R-332
• 字数: 2371字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2015.010.004

摘要

目的：建立小鼠脑脊髓炎病毒RT-PCR方法并对方法进行初步应用。方法根据NCBI 发表的TMEV GD VII株（ GI：62039）基因组序列设计特异引物，建立RT-PCR方法，验证方法的敏感性和特异性；脑腔接种方式感染9只BALB／c小鼠，感染后第6天采集动物的脑、心、肝、脾、肺、肾、盲肠内容物和血清等样本，用建立的方法进行检测；同时检测100份小鼠盲肠内容物样本，对方法进行初步应用。结果以GD VII RNA为模板，建立的RT-PCR方法能够扩增出约371bp的单一目的条带，敏感性验证显示能够检测到的最低GD VII cDNA量为0.69pg／μL；以脑心肌炎病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、日本乙型脑炎病毒、小鼠诺如病毒及正常小鼠脑组织为对照进行方法特异性验证，均未出现目的条带。脑腔接种感染小鼠，所有小鼠在接种第3天均产生不同程度的精神萎靡后肢麻痹等症状，其中2只小鼠于第5天死亡；采集心、肝、脾、肺、肾、脑、盲肠内容物及血清等样本进行检测，所有小鼠的脑组织均检测到GD VII RNA，而其他组织均未检测到；对100份小鼠盲肠内容物进行检测，结果均为阴性。结论建立的TMEV GDVII株RT-PCR方法能够高效的检测小鼠组织中的病毒感染，可作为实验动物国家标准的有力补充。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳秉飞	中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所	117	385	11.0	14.0
2	贺争鸣	中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所	100	337	9.0	14.0
3	付瑞	中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所	33	93	6.0	8.0
4	李晓波	中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所	23	46	4.0	6.0
5	王吉	中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所	24	62	5.0	6.0
6	卫礼	中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所	12	31	3.0	5.0
7	王淑菁	中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所	24	39	3.0	5.0