猪血凝性脑脊髓炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 刘爽 尼博 崔进 张安洁 张慧 张锋 李晓成 董雅琴 魏荣
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 猪血凝性脑脊髓炎病毒 实时荧光RT-PCR 探针法
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 105-109
• 页数: 5页
• 分类号: S851.3
• 字数: 2513字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.08.022

摘要

为建立一种快速、准确、常规的猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)检测方法,根据PHEV N蛋白基因序列,设计1对引物和1条探针,建立了PHEV实时荧光RT-PCR检测方法.该方法特异性好,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV2)均无交叉反应;用阳性质粒Puc57-PHEVn评估其敏感性,发现检测下限达10-6 ng/μL(224拷贝/μL).采集233份发病猪组织样品进行临床检测,发现该方法与巢式RT-PCR的符合率达98.3％,准确筛查出巢式RT-PCR并测序阳性的样品14份,且检出率高于巢式RT-PCR.结果表明,本方法敏感、特异,可用于PHEV临床样品的检测.