红蓝荧光细胞的构建

• 作者: 施新颜 王真 陈宇
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: H2B基因 蓝色荧光蛋白 黑色素瘤细胞 真核表达质粒
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 页码范围: 894-898
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3709字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2015.12.009

摘要

目的：构建人组蛋白H2B基因与蓝色荧光蛋白（BFP）融合的真核表达质粒，使其能在黑色素瘤细胞（B16细胞）中表达，形成在核区可以发出肉眼可见的蓝色荧光，胞质区发出肉眼可见红色荧光的双色荧光细胞。方法：采用普通PCR扩增得到BFP序列，通过反转录PCR（RT-PCR）从含有腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞（293细胞）中扩增获得H2B基因的部分cDNA序列。将BFP序列、H2B基因与pRetroX-Tight-Pur载体质粒来构建真核表达质粒（pRetroX-BFP-H2B），对其进行酶切并用普通PCR方法进行鉴定。采用脂质体转染技术将pRetroX-BFP-H2B重组质粒转染细胞质中能表达红色荧光蛋白（RFP）的B16细胞并观察融合蛋白的表达。结果：成功构建pRetroX-BFP-H2B质粒，经转染后的双荧光细胞可以呈现出双荧光的效果，转染后也能稳定地表达传代。结论：本研究为双色荧光细胞的构建及其荧光蛋白种类的选用提供了新的参考。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施新颜	杭州市妇产科医院检验科	13	21	3.0	4.0
2	陈宇	杭州市妇产科医院检验科	5	7	1.0	2.0
3	王真	杭州市妇产科医院检验科	3	0	0.0	0.0