摘要:
为研究乙炔基雌二醇(EE2)是否能影响雄性黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)垂体中促性腺激素3个亚基基因的表达,从而干扰 FSH 和 LH 的分泌,研究采用末端快速扩增(RACE)的方法在黄颡鱼垂体中克隆了促性腺激素的2个β亚基(FSHβ和LHβ)的全长cDNA,对其组织表达模式和雌雄性垂体中的季节表达模式进行了研究;另外,研究还用100 ng/L的EE2对雄性黄颡鱼(2龄)进行了28d的暴露处理。结果发现,黄颡鱼FSHβ cDNA全长528 bp, ORF为399 bp,编码132个氨基酸;LHβ全长为870 bp, ORF为417 bp,编码138个氨基酸。序列分析结果表明,黄颡鱼FSHβ含有一个17氨基酸的信号肽,2个保守的N-糖基化位点和13个半胱氨酸残基,而LHβ含有一个18个氨基酸的信号肽,1个N-糖基化位点和12个半胱氨酸残基,与其他鲶形目鱼类极其相似。进化分析显示,黄颡鱼FSHβ和LHβ与鲶形目的鱼类进化关系较近。组织分布结果发现,黄颡鱼3亚基均仅在垂体中表达。季节表达模式结果表明,雌雄黄颡鱼GtHα和LHβ表达水平在5月份左右达到最高,随后降低;FSHβ在雌性的表达模式与GtHα和LHβ相同,而在雄性, FSHβ的表达没有明显变化。半定量RT-PCR结果显示,100 ng/L的EE2能显著抑制黄颡鱼促性腺激素3个亚基基因的表达。研究认为, EE2抑制黄颡鱼雄性垂体FSH和LH的分泌,可能阻碍其正常的精子发生、精子成熟和排精过程,从而影响其正常的繁殖和发育。