应用单细胞cDNA扩增技术鉴定循环肿瘤细胞

• 作者: 卜芳芳 李晶晶 潘飞 王玲兄
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单细胞cDNA扩增技术 循环肿瘤细胞 激光捕获显微切割 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 1222-1226
• 页数: 5页
• 分类号: R730.43
• 字数: 3120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2015.12.017

摘要

目的 建立单细胞cDNA扩增技术,实现在分子水平鉴定循环肿瘤细胞.方法 建立结肠癌循环肿瘤细胞模型,通过免疫荧光染色和显微切割技术分离出单个血细胞和肿瘤细胞;裂解细胞后利用碱基修饰的P1(dT)24引物反转录出cDNA第一链,并给第一链cDNA加上PolyA尾后利用碱基修饰的P2(dT)24引物合成第二链cDNA,然后利用P1(dT)24和P2(dT)24引物扩增分别得到血细胞和肿瘤细胞的全长cDNA;最后通过PCR检测细胞特异的标记物CD45、EpCAM和CK19.结果 改良后的单细胞cDNA扩增方法能够获得高质量的全长cDNA,并能显著增加PCR检测效率;利用扩增得到的cDNA通过PCR检测细胞表面标记物CD45、EpCAM和CK19的表达,能有效鉴定出外周血中混杂的肿瘤细胞.结论 通过单细胞cDNA扩增技术在基因水平识别肿瘤细胞,建立了一种新的循环肿瘤细胞的鉴定方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晶晶	解放军总医院肿瘤中心实验室	9	57	3.0	7.0
2	潘飞	解放军总医院肿瘤中心实验室	4	12	2.0	3.0
3	王玲兄	解放军总医院肿瘤中心实验室	4	31	2.0	4.0
4	卜芳芳	解放军总医院肿瘤中心实验室	1	2	1.0	1.0