A组轮状病毒疫苗株LLR VP8*基因的原核表达及纯化

• 作者: 孙晓曼 曹友德 李丹地 段招军 郭妮君
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: 轮状病毒属 L-LR VP8*蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 452-454
• 页数: 3页
• 字数: 3031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2015.05.016

摘要

目的 表达A组轮状病毒疫苗株LLR的VP8*蛋白,为深入研究LLR的功能特性奠定基础.方法 从兰州生物制品所生产的A组轮状病毒疫苗中提取病毒RNA为模板,经过RT-PCR反应获得轮状病毒LLR株VP8*基因的cDNA片段,将其克隆到pGEX-4T1表达载体中构建重组质粒pGEX-4T1-VP8*,测序正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),通过SDS-PAGE电泳、免疫印迹方法检测IPTG诱导表达后的产物,用Glutathione Sepharose 4B纯化目的蛋白.结果 SDS-PAGE电泳可见大小约为52 000的融合蛋白,Western-Blot显示该蛋白能与GST标签抗体结合.结论 成功构建了包含LLR株VP8*序列的重组表达载体pGEX-4T1-VP8*,获得了可溶性GST-VP8*重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段招军	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	114	687	15.0	20.0
2	曹友德	湖南师范大学第一附属医院湖南省人民医院检验科	9	30	4.0	5.0
3	李丹地	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	24	112	6.0	10.0
4	孙晓曼	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	8	9	2.0	2.0
5	郭妮君	湖南师范大学第一附属医院湖南省人民医院检验科	3	6	2.0	2.0