轮状病毒VP4蛋白酶切片段VP5*、VP8*在原核系统中的表达

• 作者: 万言珍 孟红 岳盈盈 李志会 李鹏 金琳琳
• 来源期刊: 滨州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: RV SA11 VP5* VP8* 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 165-168
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9510.2008.03.002

摘要

目的 克隆表达轮状病毒结构蛋白VP4酶切片段VP5*、VP8*.方法 以猴轮状病毒SA11株细胞培养物提取总RNA为模板,经RT-PCR方法 获得VP5*、VP8*全长基因片段cDNA,将其重组于pET-30 a表达载体,转化大肠杆菌BL21(plyss),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物做SDS-PAGE和Western-blotting检测,目的 产物用镍柱纯化.结果 ①重组载体在IPTG诱导下,工程菌表达的两个目的 蛋白主要以包涵体形式存在;②SDS-PAGE检测表达产物与目的 蛋白大小一致,VP5*为60 kD,VP8*为28 kD,Western-blotting检测发现两目的 蛋白所带标签可与抗体反应;③镍柱纯化获得RV SA11 VP5*、VP8*蛋白,纯度达90%.结论 ①构建表达载体pET-30a-VP5*、pET-30a-VP8*;②表达、纯化VP4蛋白的VP5*、VP8*片段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟红	山东省医学科学院基础医学研究所	66	377	7.0	17.0
2	金琳琳	山东省医学科学院基础医学研究所	5	4	2.0	2.0
3	李鹏	山东省医学科学院基础医学研究所	28	96	6.0	8.0
4	万言珍	山东省医学科学院基础医学研究所	6	18	2.0	4.0
5	岳盈盈	山东省医学科学院基础医学研究所	31	69	5.0	6.0
6	李志会	山东省医学科学院基础医学研究所	24	64	5.0	6.0