农杆菌介导轮状病毒抗原蛋白VP4基因遗传转化花生的研究

• 作者: 万书波 刘峰 单世华 李春娟 毕玉平 赵晋平 闫彩霞
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 花生 子叶 遗传转化 VP4基因
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1285-1289
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

选用鲁花14与花育23花生品种,通过农杆菌介导开展了轮状病毒抗原蛋白VP4基因遗传转化研究,从转化植株中随机选取26株表现Kan抗性植株进行nptⅡ基因的PCR检测,结果有22株能扩增出620 bp左右的nptⅡ基因条带,阳性率约为84.62%.提取nptⅡ基因显示为阳性的植株叶片DNA作模板,用VP4基因特异引物进行PCR扩增,经琼脂糖凝胶电泳分析,所有nptⅡ基因阳性的植株均扩增出了约2 350 bp的特异性条带,而野生型没有.对部分转基因植株进一步进行PCR-Southern杂交和Southern杂交分析,发现转基因植株中出现了阳性杂交信号,表明VP4基因的确已经整合到花生的基因组中,并且是1-2个拷贝.用RT-PCR分析了11株转G1VP4基因的植株,证明插入鲁花14中的VP4基因已经正常转录,利用Western blot方法检测筛选到的4株转基因花生,分别提取其蛋白,在30 kD处出现特异性蛋白条带,这为获得转基因创新种质材料奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕玉平	山东省农业科学院高新技术研究中心	65	1422	19.0	36.0
2	刘峰		187	2005	23.0	40.0
5	闫彩霞		42	238	10.0	13.0
6	李春娟		45	478	11.0	21.0
7	单世华		70	734	15.0	24.0
8	万书波		25	889	15.0	25.0
15	赵晋平	山东省农业科学院高新技术研究中心	1	4	1.0	1.0