猪轮状病毒VP4蛋白基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 刘成倩 卢永红 吴双林 张天庆 易建中 肖长峰 陈斌
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 轮状病毒 VP4基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（22）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 10431-10432,10448
• 页数: 3页
• 分类号: S828
• 字数: 2879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.22.040

摘要

[目的] 研究猪的轮状病毒VP4蛋白基因在BL21大肠杆菌中的表达.[方法] 以猪肺脏组织中分离的总RNA为模板,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增VP4蛋白的部分基因, 将PCR产物克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建原核表达质粒PGEX-4T-1-VP4并对重组质粒进行酶切和测序鉴定.将重组载体PGEX-4T-1-VP4转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达和SDS-PAGE分析,并对重组大肠杆菌进行可溶性分析.[结果] 对猪肺脏组织中分离的总RNA进行RT-PCR扩增,获得875 bp的VP4部分基因,重组质粒PGEX-4T-1-VP4经BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切和测序鉴定后,插入的猪轮状病毒VP4 的cDNA编码区序列与已公布的猪GenBank 核酸序列比对结果为99.5%;将重组质粒pGEX-4T-1-VP4-转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析, 可见约58 kDa融合蛋白带.[结论] 该研究为进一步研究轮状病毒的疫苗研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢永红	上海海洋大学水产与生命学院	34	246	7.0	14.0
3	陈斌	上海市农业科学院畜牧兽医研究所	3	13	2.0	3.0
4	肖长峰	上海海洋大学水产与生命学院	2	12	2.0	2.0
5	刘成倩	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	3	15	3.0	3.0
6	吴双林	上海市农业科学院畜牧兽医研究所	3	14	3.0	3.0
9	张天庆	上海市农业科学院畜牧兽医研究所	2	11	2.0	2.0