猪A组轮状病毒Vp7基因与双标记表达载体pW425et的重组及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 宁军 王春凤 肖冲 胡静涛
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 轮状病毒 Vp7基因 表达载体 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 84-88
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S852
• 字数: 3672字
• 语种: 中文

摘要

以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了981 bp的Vp7基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T载体中,构建出克隆质粒pGEM-T-Vp7.以Sac Ⅰ和Kpn Ⅰ双酶切pGEM-T-Vp7及双标记表达载体pW425et,并将纯化的Vp7基因亚克隆至双标记表达载体pW425et中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425et-Vp7.将pW425et-Vp7转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态Escherichia coli X13中,经生长功能弥补筛选阳性克隆和SDS-PAGE分析,可见约40 kD的融合蛋白.Western blot分析表明该蛋白具有与猪轮状病毒多克隆抗体的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春凤	吉林农业大学动物科技学院	134	596	12.0	16.0
2	胡静涛	吉林农业大学动物科技学院	22	50	4.0	6.0
3	宁军	吉林农业大学动物科技学院	2	7	1.0	2.0
4	肖冲	吉林农业大学动物科技学院	1	1	1.0	1.0