猪轮状病毒VP7蛋白在E.coli中的表达纯化

• 作者: 余丽芸 侯喜林 张露
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪轮状病毒 VP7蛋白 原核表达 间接免疫荧光
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: S432.2+1|S435.111.4+1
• 字数: 3600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2018.01.003

摘要

为制备猪轮状病毒VP7蛋白的多抗,构建大肠杆菌表达载体pQE-30-VP7,表达猪轮状病毒VP7蛋白,纯化重组蛋白VP7并对其进行鉴定.利用RT-PCR方法扩增出猪轮状病毒VP7全长基因1062 bp,克隆到pMD18-T载体中,利用SalⅠ和HindⅢ消化重组DNA进行酶切鉴定,定向克隆到表达载体pQE-30中,转化E.coli BL21(DE3)株,经PCR和酶切鉴定阳性质粒,经IPTG(终浓度为1 mmoL·L-1)37℃进行诱导,Western blot和间接免疫荧光检测目的蛋白的反应原性.酶切和序列表明成功构建原核表达系统,重组大肠杆菌经IPTG诱导后,我们发现该重组蛋白主要以包涵体形式存在于细菌中,大小约为43 KDa,Western blot和间接免疫荧光分析表明该VP7重组蛋白可与PoRV阳性血清发生了特异性反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余丽芸	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	126	465	10.0	16.0
2	侯喜林	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	115	607	13.0	19.0
3	张露	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	5	11	2.0	3.0