人A组轮状病毒结构蛋白VP7原核表达及其卵黄抗体效价的研究

• 作者: 唐文才 张智 李丙超 李再新 胡卫东 黄永生
• 来源期刊: 四川理工学院学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人A组轮状病毒 VP7 原核表达 包涵体 免疫 卵黄抗体
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 化学、生物及材料科学
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R113|R272.5
• 字数: 3772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11863/j.suse.2014.03.04

摘要

为获得人A组轮状病毒重组结构蛋白VP7及其高效价的卵黄抗体,使用PCR技术扩增VP7 DNA片段并将其克隆到原核表达载体pET28a上形成重组质粒pET28a-VP7.将重组质粒转化基因工程菌E.Coil BL21 (DE3),用0.5 mM IPTG诱导VP7重组蛋白的表达.通过包涵体纯化和蛋白复性后,将VP7重组蛋白与弗氏佐剂混匀免疫产蛋鸡,收集鸡蛋.用水稀释-盐析法纯化卵黄抗体IgY.进一步应用SDS-PAGE、ELISA和点杂交技术,分析该卵黄抗体的纯度、效价和特异性.结果表明在基因工程菌E.coli BL21(DE3)中能够实现VP7重组抗原的表达,将重组抗原VP7免疫产蛋鸡,提取纯化得到滴度为1∶100 000的抗VP7卵黄抗体,且特异性的识别野生型A组轮状病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李再新	四川理工学院化学与制药工程学院	53	270	9.0	14.0
2	张智	四川理工学院化学与制药工程学院	21	46	4.0	5.0
3	黄永生		2	3	1.0	1.0
4	李丙超	四川理工学院生物工程学院	5	10	3.0	3.0
5	胡卫东	四川理工学院化学与制药工程学院	5	10	3.0	3.0
6	唐文才	四川理工学院生物工程学院	4	3	1.0	1.0