水中抑制物对定量PCR与膜过滤法检测E.coli的影响

• 作者: 吉铮 周进宏 张崇淼 徐丽梅 王晓昌
• 来源期刊: 环境工程学报
• 学科: 地球科学
• 关键词: E.coli 实时荧光定量PCR 膜过滤 腐殖酸 抑制作用
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 水污染防治
• 页码范围: 609-614
• 分类号: X832
• 语种: 中文

摘要

针对水中病原微生物的污染,选择大肠埃希氏菌E.coli作为病原示踪剂,以E.coli染色体上β-葡萄糖醛酸酶uidA目的基因建立了SYBR Green实时荧光定量PCR的检测方法.该定量PCR方法灵敏度高,检测限可达104 CFU/L,线性关系良好,相关系数为R2=0.999.研究表明,定量PCR与菌液浓度呈显著正相关R2=0.935.通过人工投加腐殖酸、COD,研究了水中抑制物对定量PCR和膜过滤MF培养法的影响.结果显示,腐殖酸可使E.coli在培养皿上的菌落变小聚集,且显色不明显,当腐殖酸量为20 mg/L时,浓度为50 CFU/100 mL的E.coli完全受到抑制,没有菌落出现.腐殖酸对PCR扩增的抑制作用明显,当腐殖酸浓度增加到10 mg/L,定量PCR检测结果基因拷贝数减少约1 log,增加到20 mg/L定性PCR检测结果为阴性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓昌	西安建筑科技大学环境与市政工程学院西北水资源与环境生态教育部重点实验室	415	4942	33.0	47.0
2	吉铮	西安建筑科技大学环境与市政工程学院西北水资源与环境生态教育部重点实验室	6	49	3.0	6.0
3	周进宏	西安建筑科技大学环境与市政工程学院西北水资源与环境生态教育部重点实验室	8	35	2.0	5.0
4	徐丽梅	西安建筑科技大学环境与市政工程学院西北水资源与环境生态教育部重点实验室	6	17	2.0	4.0