甘蓝型油菜 SSR－PCR 体系优化

• 作者: 关萍 冯旭东 张凯凯 徐玲玲
• 来源期刊: 山地农业生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 油菜 SSR 优化
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 30-36
• 页数: 7页
• 分类号: S565.4
• 字数: 5158字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2015.06.006

摘要

SSR－PCR 体系的优化是 SSR 分子标记的基础，本实验利用正交 L9（34）设计实验对油菜 PCR 反应体系：Mg2＋、dNTP、引物、Taq 酶4个因素设计了3个水平进行优化实验，又进行反应体系温度和银染液浓度优化，获得最佳体系：10×buffer、1.5 mmol ／LMg2＋0.1 mmol ／LdNTP、0.4 mmol ／L 引物、0.05 U Taq 酶、100 ng／ul 模板，加 ddH20补足10 ul，最适 PCR 反应程序94℃预变性3 min，94℃变性30 s，60℃30 s，72℃45 s 进行1个循环，接下来的8个循环每循环降低0.5℃，共9个循环，然后进行94℃30 s，57℃30 s，72℃45 s，进行36个循环，最后72℃延伸10 min，4℃保存，银染最适浓度0.1％，确立了一套高效的体系。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	关萍	贵州大学生命科学学院	52	337	12.0	15.0
2	冯旭东	贵州大学生命科学学院	6	25	3.0	5.0
3	张凯凯	贵州大学生命科学学院	9	32	4.0	5.0
4	徐玲玲	贵州大学生命科学学院	10	48	5.0	6.0