基于报告基因的抗CD20单克隆抗体ADCC生物学活性测定方法的建立

• 作者: 于传飞 刘春雨 张峰 李萌 王兰 王文波 郭玮 高凯
• 来源期刊: 药学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗CD20单克隆抗体 ADCC 生物学活性
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 药物分析
• 页码范围: 94-98
• 页数: 5页
• 分类号: R917
• 语种: 中文

摘要

利用Jurkat/NFAT-luc+ FcγRⅢa转基因细胞系作为效应细胞,WIL2-S细胞系作为靶细胞,通过荧光素酶检测系统(BioGloTM Luciferase Assay System)进行抗CD20单抗的ADCC生物学活性检测,并对实验条件进行优化及方法学验证.结果显示抗CD20单抗在该方法中存在量效关系,且符合四参数方程式:y=(A-D)/[1+(X/C)B]+D.方法经优化确定靶细胞为WIL2-S细胞,抗体稀释浓度为18 000 ng·mL-1,1:5倍的稀释倍数,效靶比为6∶1,诱导时间为6h.该方法具有良好的专属性,8次独立实验的回归分析、线性及平行性均通过统计学检验;4个不同稀释组回收率样本经3次测定,相对效价分别为(44.39±3.93)％、(72.74±2.78)％、(128.28±7.01)％和(168.19±2.70)％,变异系数均小于10％,对应回收率分别为(88.78±7.85)％、(96.99±3.70)％、(102.63±5.61)％和(112.12±1.80)％.本研究利用转基因细胞法成功建立抗CD20单抗ADCC生物学活性检测方法,该方法专属性强、重复性好,准确性高,可作为抗CD20单抗ADCC生物学活性的常规检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李萌		37	50	4.0	6.0
2	于传飞		38	21	2.0	4.0
3	王文波		32	10	1.0	3.0
4	王兰		59	65	6.0	7.0
5	郭玮		17	20	2.0	4.0
6	刘春雨		24	16	2.0	4.0
7	高凯		49	71	6.0	7.0
8	张峰		31	18	2.0	4.0