猪传染性胃肠炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 于红欣 周双海 孟凡伟 张雪 杨倩 王俊
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR 早期快速诊断
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 644-648
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

为了建立一种定量检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的实时荧光定量PCR方法,用RT-PCR扩增TGEV的M基因片段,构建含有TGEV M基因片段的重组质粒.用系列稀释后的重组质粒为模板,基于SYBR GreenⅠ来进行检测TGEV的实时荧光定量PCR扩增.结果显示,扩增效率为103.0％,相邻扩增曲线之间间距均匀,所有产物的熔解曲线具有单一整齐的峰,标准曲线具有优良的线性关系,最低可准确检测63 copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于3％.用建立的PCR对3种常见猪源RNA病毒的检测结果均为阴性,对65份临床样品的检出率高于常规PCR.结果表明,建立了一种灵敏度高、特异性强、重复性好的检测TGEV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,可用于TGEV的定量检测和猪传染性胃肠炎的早期快速诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周双海		59	192	8.0	10.0
2	杨倩		8	7	2.0	2.0
3	于红欣		15	38	3.0	6.0
4	张雪		7	43	3.0	6.0
5	孟凡伟		10	34	4.0	5.0
6	王俊		9	19	3.0	4.0