猪呼吸道病相关的常见病毒 PCR／RT-PCR 检测方法的建立

• 作者: 刘霞 唐宇 张元鑫 曾智勇 李达 汤德元 王洪光 韦冠东 马萍
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒 2 型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪细小病毒 猪流感病毒 PCR/RT-PCR 方法
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 45-48
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3276字
• 语种: 中文

摘要

为建立猪呼吸道病相关的几种病毒 PCR／RT-PCR 检测方法，根据 GenBank 登录的猪伪狂犬病病毒（PRV，gB，AF257079）、猪圆环病毒2型（PCV-2，ORF2，NC-005148）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV，ORF6，NC-001961）、猪瘟病毒（CSFV，C，AY805221）、猪细小病毒（PPV，NS1，NC-001718）和猪流感病毒（SIV，M，GU086140）6种常见病毒的相关保守基因序列分别设计一对特异性引物，通过对其条件的优化，建立了检测以上6种病毒的 PCR／RT-PCR 诊断方法，扩增的目的片段长度分别为192 bp（PRV）、255 bp（PCV-2）、364 bp（PRRSV）、530 bp（CSFV）、759 bp（PPV）和981 bp（SIV）。通过试验证明该检测方法具有良好的特异性和敏感性，对该6种病毒的核酸检测最小量依次为2．5×10－3 ng、2．2×10－4 ng、3．2×10－3 ng 、8．3×10－3 ng、3．7×10－3 ng 和3．7×10－3 ng，为检测以上6种病毒提供了参考。