异色瓢虫卵黄蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 何运转 刘廷辉 曹美琳 梁超 陈洁 马卓
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 异色瓢虫 卵黄蛋白 单克隆抗体 亚型 亚基鉴定
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1186-1193
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2015.11.005

摘要

[目的]为了能准确地追踪异色瓢虫Harmonia axyridis (Pallas)卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)的合成、转运途径和吸收方式,以及卵黄蛋白(vitellin,Vn)在卵母细胞内的积累及分布情况,本研究对异色瓢虫的Vn进行了单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)的制备.[方法]以异色瓢虫Vn免疫BLAB/C小鼠,应用杂交瘤技术,经过3次亚克隆筛选,制备能稳定分泌抗Vn的单克隆抗体.[结果]实验获得4株能够稳定分泌抗异色瓢虫Vn的单克隆抗体,即5E2,5E11,1E9和5H8.其中1E9,5E11和5E2亚型均为IgG1,5H8亚型为IgM.Western blot免疫印迹分析显示,4株单克隆抗体可以特异性地识别Vn,而与雄虫血淋巴无反应.其中,5E2和1E9可以与异色瓢虫抗原的4个亚基发生较强的免疫反应,结合腹水制备前上清效价检测结果最终选取5E2制备单克隆抗体.5E2单克隆抗体的效价为1:81 000,SDS-PAGE分析显示5E2重链和轻链的分子量分别为50和27 kD.[结论]本实验成功制备出一株能够稳定分泌抗异色瓢虫Vn的单克隆抗体,为建立酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定其动态变化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何运转	河北农业大学植物保护学院	52	473	13.0	19.0
2	陈洁	河北农业大学植物保护学院	10	91	6.0	9.0
4	梁超	河北农业大学植物保护学院	5	11	2.0	3.0
5	刘廷辉	河北农业大学植物保护学院	29	97	6.0	7.0
8	马卓	河北农业大学植物保护学院	7	26	3.0	5.0
12	曹美琳	河北农业大学植物保护学院	2	9	2.0	2.0