家蝇热休克蛋白HSP20基因克隆、表达和序列分析

• 作者: 修江帆 吴建伟 国果 彭传林 王宇 魏川川
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 家蝇 热休克蛋白20(HSP20) 克隆 表达 序列分析
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 330-333
• 分类号: R181.2+4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11847/zgggws2015-31-03-23

摘要

目的 对家蝇热休克蛋白20(HSP20)基因进行生物信息学分析,并进行克隆、表达研究.方法 利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白序列的分析工具,结合其他生物信息学分析软件包,从GenBank上家蝇基因组序列识别出编码HSP20的基因,分析预测该蛋白质的结构功能;设计引物PCR扩增HSP20基因,将其克隆到原核表达质粒PEASY-E1中,重组质粒在大肠杆菌OrigmiB/DE3中经用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定.结果 HSP20基因序列全长865bp,最大开放阅读框(ORE)为567bp,编码188个氨基酸,理论分子量为21443.2 Da,等电点为5.96;所构建的重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定成功;SDS-PAGE分析结果显示,重组质粒在OrigmiB/DE3中表达并纯化,得到的融合蛋白相对分子质量约为21443.2 Da,诱导12 h蛋白表达量最高,SDS-PAGE法得到的蛋白条带与目的蛋白大小相符.结论 成功构建PEASY-E1-HSP20重组原核表达质粒并表达出融合HSP20蛋白,为进一步研究该蛋白的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	国果	贵阳医学院寄生虫学教研室	62	450	11.0	16.0
2	吴建伟	贵阳医学院寄生虫学教研室	83	698	14.0	21.0
3	修江帆	贵阳医学院寄生虫学教研室	16	51	4.0	6.0
4	王宇	贵阳医学院寄生虫学教研室	18	40	4.0	5.0
8	魏川川	贵阳医学院寄生虫学教研室	9	31	4.0	5.0
9	彭传林	贵阳医学院寄生虫学教研室	6	21	3.0	4.0