针对人STAT1基因的RNA干扰有效靶点的设计与筛选

• 作者: 丁治国 何蓓 张韬 李乃卿 李会龙 王鑫 陈晓珩 高翔
• 来源期刊: 中国现代普通外科进展
• 学科: 医学
• 关键词: STAT1基因 慢病毒载体 RNA干扰 MHCC97L细胞
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 925-928
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 2031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9905.2015.12.001

摘要

目的:设计并筛选针对人STAT1基因有效的RNA干扰靶点.方法:根据人STAT1基因序列,设计3个干扰序列,将oligo退火成双链并连接穿梭载体pLKO-1-EGFP-puro-shRNA,构建shRNA慢病毒载体质粒,并转化至感受态细胞DH5a,进行测序验证.在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产慢病毒.慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L的STAT1过表达瘤株(MHCC97L-stat1),用Real-time PCR检测干扰效果.结果:测序证实3个STAT1基因RNAi病毒载体质粒构建成功;慢病毒载体经293T细胞包装成功;3个慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L-stat1瘤株48 h后,STAT1基因在mRNA水平表达均受到抑制,其中MHCC9-L-stat1-shRNA-1序列效果最佳,对STAT1基因表达的干扰效率可达81.4％.结论:成功构建并筛选了人STAT1基因RNAi慢病毒载体及有效靶点,为进一步深入研究STAT1基因与抗肿瘤药物药效关系奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李乃卿	北京中医药大学东直门医院外科	35	203	8.0	13.0
2	丁治国	北京中医药大学东直门医院东区外科	37	150	7.0	10.0
3	陈晓珩	北京中医药大学东直门医院外科	21	38	3.0	4.0
4	何蓓	北京中医药大学第三附属医院医务处	6	25	3.0	4.0
5	高翔	北京中医药大学东直门医院外科	12	27	3.0	4.0
6	王鑫	北京中医药大学东直门医院外科	48	182	7.0	11.0
7	张韬	北京中医药大学东直门医院东区外科	12	100	7.0	10.0
8	李会龙	北京中医药大学东直门医院外科	8	4	1.0	1.0