人SUMO1基因的真核表达载体构建及其RNA干扰靶点筛选

• 作者: 单黎然 吴勇延 宋振 肖亮 郭泽坤
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: SUMO1 RNA干涉 双启动子载体
• 年，卷（期）: 2010,（29）
• 页码范围: 16134-16137
• 分类号: S188
• 字数: 3923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.29.020

摘要

[目的]构建人SUMO1的真核表达载体,筛选SUMO1的有效干涉靶点.[方法]将SUMO1亚克隆至载体pCMV-HA中.寻找可能的干涉位点,合成上下游引物,退火后直接克隆入GFP-HU双启动子载体.用Western Blot和细胞荧光的方法检测各载体对外源性SUMO融合蛋白表达的影响,其后检测对内源性SUMO1表达的敲降效果.[结果]构建的人SUMO1真核表达载体pCMV-HA-SUMO1测序正确.针对267、279、293、309、342、386等不同干涉靶点构建双启动子干扰载体,其中293位点的干涉载体在Western Blot和荧光检测试验中均表现出稳定的敲降效果,抑制了SUMO1的表达.[结论]该研究成功构建了SUMO1的真核表达载体及具有明显敲降效果的干涉载体,可为后续研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴勇延	西北农林科技大学生命科学学院	7	40	3.0	6.0
2	郭泽坤	西北农林科技大学生命科学学院	15	12	2.0	3.0
3	肖亮	西北农林科技大学生命科学学院	6	9	2.0	3.0
4	单黎然	西北农林科技大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
5	宋振	第四军医大学航空航天医学系生理教研室	5	2	1.0	1.0