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摘要:
目的:构建21.5 kD MBP基因干扰序列21.5 kD MBP-shRNA(21.5 kD MBP short hairpin RNA interference),筛选最佳沉默效果的21.5 kD MBP-shRNA真核表达载体,为21.5 kD MBP基因功能研究提供实验材料.方法:将21.5 kD MBP-shRNA阳性真核表达载体和阴性真核表达载体经脂质体介导分别转入人神经胶质瘤细胞株U251中,观察转染24 h后的转染效率;提取各组细胞总RNA,用实时荧光定量PCR技术检测各组21.5 kD MBP基因在mRNA水平的表达差异性.结果:21.5kD MBP-shRNA真核表达重组载体被成功转染人U251细胞,与阴性对照质粒(pGenesil-1-M BP-neg)转染组相比,沉默质粒转染组(pGenesil-1-MBP-1、pGenesil-1-MBP-2、pGenesil-1-MBP-3质粒分别转染)细胞中21.5 kD MBP mRNA表过水平均显著下降(P<0.05),其中pGenesil-1-MBP-3转染组细胞中21.5 kD MBP mRNA表达水平最低.结论:成功筛选出最佳沉默效果的21.5 kD MBP-shRNA真核表达载体,为21.5 kD MBP基因功能研究及基因治疗研究奠定了实验基础.
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文献信息
篇名 21.5kD MBP RNAi有效靶点的筛选及验证
来源期刊 川北医学院学报 学科
关键词 髓鞘碱性蛋白 21.5kD MBP-shRNA表达载体 基因干扰
年,卷(期) 2013,(2) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 112-116
页数 5页 分类号 R966
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1005-3697.2013.02.006
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 鄢佳程 川北医学院生物化学教研室 10 65 6.0 7.0
2 陈建业 川北医学院应用技术研究所 40 324 10.0 17.0
6 宋永燕 川北医学院生物化学教研室 8 32 3.0 5.0
7 王含彦 川北医学院生物化学教研室 33 153 7.0 10.0
8 易芳 川北医学院生物化学教研室 24 74 4.0 7.0
9 田瑞敏 川北医学院应用技术研究所 13 37 3.0 5.0
10 唐华英 川北医学院应用技术研究所 5 52 3.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
髓鞘碱性蛋白
21.5kD MBP-shRNA表达载体
基因干扰
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
川北医学院学报
双月刊
1005-3697
51-1254/R
大16开
1975-01-01
chi
出版文献量(篇)
6664
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18062
论文1v1指导