水牛透明带3基因启动子克隆及转录活性检测

• 作者: 庞春英 朱鹏 杨炳壮 梁贤威 段安琴 邓廷贤 陆杏蓉 陈明棠
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水牛 ZP3基因 克隆分析 转录活性
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖
• 页码范围: 1350-1356
• 页数: 7页
• 分类号: S823.8+3.2
• 字数: 4065字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2015.06.024

摘要

为了阐明水牛透明带3基因（ ZP3）表达调控机理，通过PCR技术、载体构建和细胞转染等技术，对其转录活性进行了研究。结果表明：成功克隆得到广西本地水牛ZP3基因5′侧翼序列及部分编码区序列（ CDS）区序列，共3081 bp；广西本地水牛ZP3核苷酸序列与河流型水牛、黄牛、绵羊和山羊的相似性分别为99％、96％、92％和92％；在ZP3翻译起始位点上游－147 bp至－196 bp处存在TATA box，启动子区存在GATAs、Foxo3、Nobox、Stat3、Stat4、Stat5a、Stat5b、Stat6和YY1等反式作用因子结合位点，其中Stats家族在ZP3启动子区存在多个结合位点，且同一位点又存在多个Stats结合的情况；水牛ZP3启动子不能启动绿色荧光蛋白（ Enhanced green fluores?cent protein， EGFP）在HEK?293T细胞中的表达，但能启动其在CHO细胞中的表达，且启动子活性比CMV启动子弱。