摘要:
目的 比较以白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)和重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,rEPA)为载体蛋白,分别与伤寒Vi多糖(typhoid Vi polysaccharide,STVi)偶联的结合物的理化特性、抗原性及免疫效应.方法 分别以DT、rEPA为载体蛋白,以己二酰肼(adipyl dihydrazide,ADH)为连接剂,使Vi多糖与载体蛋白共价偶联制备多糖蛋白结合物STVi-DT和STVi-rEPA,检测其理化特性指标、抗原性,再将其于0、14、28 d免疫NIH小鼠,经眼眶采血,分离血清,采用间接ELISA法检测小鼠血清抗体水平,分析其免疫原性、免疫记忆效应及免疫持久性.结果 STVi-DT、STVi-rEPA理化特性指标相似.STVi-DT针对STVi、DT抗血清均具有明显抗原性,而针对rEPA抗血清无抗原性,STVi-rEPA针对STVi、rEPA抗血清均具有明显抗原性,而针对DT抗血清无抗原性.Vi多糖和Vi多糖蛋白结合物均具有动物免疫原性,STVi蛋白结合物较STVi具有更强的免疫原性,STVi-DT的动物免疫原性试验结果略优于STVi-rEPA;免疫2剂STVi-DT和STVi-rEPA后,小鼠血清GMT明显升高,且STVi-DT组明显高于STVi-rEPA组(P<0.05),具有较强的免疫记忆效应;免疫STVi-DT和STVi-rEPA后,小鼠血清GMT随免疫剂次增加和时间延长持续升高,直至稳定在一定水平,免疫持久性较好.结论 STVi-DT、STVi-rEPA理化特性相似,均具有显著的免疫原性、免疫记忆效应及免疫持久性,而STVi-DT免疫原性、免疫记忆效应更强.