AphA蛋白对副溶血弧菌vopT的转录调控研究

• 作者: 何婷 侯书宁 周冬生 张义全 张伟 徐淼 杨瑞馥 黄新祥
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 副溶血弧菌 转录调控 AphA vopT
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 医学微生物
• 页码范围: 1971-1976
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140957

摘要

[目的]研究副溶血弧菌AphA对vopT的转录调控机制.[方法]提取野生株(WT)和aphA突变株0qphA)的总RNA,采用引物延伸实验研究vopT的转录起始位点,并根据产物的丰度差异判断AphA对其调控关系.分别将WT和△aphA的总RNA逆转录成cDNA,利用实时定量RT-PCR进一步研究AphA对靶基因的调控关系.将vopT的启动子区克隆入pHRP309质粒的p-半乳糖苷酶基因上游,构建LacZ重组质粒,并将该重组质粒转入WT和⊿aphA4中,通过测定并比较两株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定AphA对vopT的调控关系.PCR扩增靶基因整个启动子区DNA序列,并纯化His-AphA蛋白,利用凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-AphA对靶基因启动子区是否具有直接的结合作用.[结果]vopT只有一个转录起始位点A(-86),且其转录活性受AphA的间接抑制.RT-PCR和EMSA结果显示AphA对vtrA的转录也具有间接的抑制作用.[结论]AphA间接抑制vopT转录,且该间接抑制作用与VtrA无关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄新祥	江苏大学医学院	57	333	5.0	17.0
2	侯书宁	江苏大学医学院	4	3	1.0	1.0
3	张伟	河北北方学院附属第一医院微生物科	7	10	2.0	3.0
4	何婷	江苏大学医学院	1	0	0.0	0.0
5	徐淼	江苏大学医学院	1	0	0.0	0.0
6	杨瑞馥	北京微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
7	周冬生	北京微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0