枯草芽孢杆菌核黄素操纵子与ribC基因的修饰与遗传效应

• 作者: 刘露 夏苗苗 班睿
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 核黄素 rib操纵子 ribC基因 mRNA稳定子
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 工业微生物
• 页码范围: 9-16
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140364

摘要

[目的]研究核黄素操纵子(rib)组成型高表达,以及ribC基因低水平表达对枯草芽孢杆菌过量合成核黄素的影响.[方法]在染色体原位修饰启动子,用mRNA稳定子替换mRNA前导区,使rib操纵子组成型高表达;修饰ribC基因的启动子,降低ribC基因的表达水平.采用qRT-PCR方法,表征基因的相对表达水平;通过摇瓶发酵,测定重组菌的生物量和核黄素产量,表征相关基因修饰所表现的遗传效应.[结果]用gsiB mRNA稳定子替换核黄素操纵子的mRNA前导区,使其相对表达水平提高了约1 500倍.ribC基因启动子-35区的首个碱基由“T”突变为“C”,使ribC基因的表达水平下降了97％以上.得到的重组菌株LX34在补加蔗糖20 g/L的LB培养基上摇瓶发酵36 h,可积累核黄素2.1 g/L,同时生物量没有明显下降.[结论]使用gsiB mRNA稳定子,能够有效地提高目标基因或操纵子的表达水平;启动子-35区首个碱基的点突变,能够有效降低ribC基因的表达水平;rib操纵子过量表达和ribC基因低水平表达,使细胞能够过量合成并积累核黄素.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	班睿	天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室	29	408	10.0	19.0
2	刘露	天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室	6	35	2.0	5.0
3	夏苗苗	天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室	2	2	1.0	1.0