siRNA沉默Cdkl5对原代皮质神经元Mecp2及其下游靶基因表达的影响

• 作者: 杨文旭 潘虹
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: Rett综合征 Cdkl5 Mecp2 Bdnf
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 884-888
• 页数: 5页
• 分类号: R72
• 字数: 2610字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨CDKL5在Rett综合征中与MeCP2相互作用的机制.方法 体外培养孕18 dSD胎鼠皮质神经元,通过小RNA干扰技术(siRNA)敲低Cdkl5,分为干扰组(Cdkl5 shRNA)和对照组(control shRNA).用Real time-PCR及Western blot法评估Cdkl5在mRNA和蛋白水平被敲低的效率;Cdkl5表达降低后Mecp2和Mecp2相关的下游靶基因表达变化.对Cdkl5 shRNA转染后神经元用CCK8法检测吸光度值评估神经元活力;用real time-PCR和West-em blot法检测凋亡基因caspase3和凋亡活性蛋白cleaved-caspase3评估神经元凋亡状态.结果 干扰组与对照组比较,Cdkl5在mRNA水平下降73％,在蛋白水平下降75％(P＜0.05);Mecp2在mRNA和蛋白水平升高约2倍(P ＜0.05);BdnfⅪ在mRNA水平明显下降,Psd95在mRNA水平明显上升(P＜0.05).结论 建立稳定的Cdkl5基因敲低的原代皮质神经元模型,并初步提示CDKL5可能通过对MeCP2的调控诱导了下游靶基因的变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘虹	北京大学第一医院实验中心	69	278	8.0	11.0
2	杨文旭	北京大学第一医院实验中心	2	4	1.0	2.0