猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立及临床应用

• 作者: 周远成 徐志文 朱玲 李碧 王黎 郭万柱
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) N基因 RT-PCR 诊断
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 190-194
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank登录的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的N基因,针对其保守序列,设计并合成1对引物,可特异性扩增长度为590 bp目的条带,成功建立了检测TGEV的RT-PCR方法.以等量同一浓度的同一TGEV阳性病毒液进行重复性试验,其3次扩增特异性条带大小均为590 bp.以猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV),猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(RV)进行特异性试验,其结果显示仅TGEV扩增得到预期特异性目的条带.以TGEV阳性病毒液提取的cDNA用紫外分析仪确定核酸质量浓度为1 g/L后,用dd H2O按10倍稀释,稀释度为10-1～10-5,其均能扩增出590 bp特异性条带.在猪传染性胃肠炎高发季节的2013年9月至2014年1月对四川成都、德阳、绵阳、遂宁、南充各地猪场送检的疑似猪传染性胃肠炎感染病猪的临床样品15份,进行检测,其猪传染性胃肠炎阳性率为100％.并且对四川成都、德阳、绵阳、遂宁、南充各地猪场保育舍随机采集的1～10周龄仔猪临床样品500份,进行检测,其1～2周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为17％,病死率为100％,3～4周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为14％,病死率为78.6％,5～6周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为9％,病死率为44.4％,7～8周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为4％,病死率为25％,9～10周龄仔猪传染性胃肠炎阳性率为1％,病死率为0％.从地区来看,在这500份样品中,成都、德阳、绵阳、遂宁、南充地区此病的阳性率分别为15％,6％,10％,6％,8％.以上结果显示所建立的TGEV RT-PCR检测方法,重复性好,特异性强,敏感性高,可用于该病的临床诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玲	四川农业大学动物生物技术中心	151	499	13.0	17.0
5	徐志文	四川农业大学动物生物技术中心	184	909	15.0	20.0
9	周远成	四川农业大学动物生物技术中心	40	105	6.0	9.0
10	王黎	四川农业大学动物生物技术中心	1	23	1.0	1.0
11	李碧	四川农业大学动物生物技术中心	4	23	1.0	4.0