HPV-16 E6、E7基因慢病毒真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 方芳 武贵臻 盛磊 胡尔西旦·尼牙孜 阿布力孜·阿布杜拉
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 HPV16 E6 E7基因 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 734-738
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3814字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5551.2015.06.018

摘要

目的：构建人乳头瘤病毒（HPV）E6、E7基因慢病毒真核表达载体。方法以 SiHa 宫颈癌细胞总RNA 为模板，利用 RT-PCR 技术扩增出 E6、E7目的片段；选用病毒载体 pLenti6／V5 Directional TOPO Cloning Kit 系统构建 E6、E7基因慢病毒真核表达载体；分别使用构建好的 E6、E7载体转染病毒包装细胞，获得含病毒的上清液，并测定上清液中慢病毒的滴度。结果质粒测序所得序列与人乳头瘤病毒 E6、E7基因序列完全吻合，载体构建成功；慢病毒滴度测定结果显示 E6样品的慢病毒滴度为1．5×108 TU／mL，E7样品的慢病毒滴度为2×108 TU／mL，该滴度能够满足后续研究所需。结论 HPV-16 E6、E7基因慢病毒真核表达载体构建成功，可以为进一步研究人乳头瘤病毒 E6、E7基因致病机理奠定物质基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武贵臻	新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室	43	179	8.0	11.0
2	阿布力孜·阿布杜拉	新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室	60	299	9.0	12.0
3	盛磊	新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室	24	119	7.0	9.0
4	胡尔西旦·尼牙孜	新疆医科大学第一附属医院肿瘤中心	32	183	8.0	12.0
5	方芳	新疆医科大学第一附属医院妇科	5	13	2.0	3.0