猪血凝性脑脊髓病毒在J774A.1细胞中的增殖特性及炎性因子表达

• 作者: 兰云刚 唐博 张竞 潘伟 田忠华 贺文琦 高丰
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪血凝性脑脊髓炎病毒 巨噬细胞 细胞因子 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 680-685
• 分类号: S852.3
• 语种: 中文

摘要

为了探讨宿主巨噬细胞(J774A.1细胞)在猪血凝性脑脊髓炎病毒(Procine hemagglutinatin encephalomyelitis virus,PHEV)感染过程中的作用及其参与炎性反应的应答特征,本研究通过CPE观察、TCID50、免疫荧光(IFA)、ELISA和PT-PCR等方法,对PHEV感染J774A.1细胞的增殖特性及炎性因子IL-6、TNF-a、IL-1β等mRNA转录水平和蛋白水平的表达情况进行检测分析.IFA的检测结果显示,感染后8h后仅有少量的被荧光抗体标记细胞出现绿色荧光,随着感染时间的延长,荧光标记的细胞逐渐增加,直至感染后32～40 h出现大量细胞出现荧光.TCID50结果显示,PHEV感染滴度的增值趋势与mRNA含量的变化基本一致,在感染后24～32 h增殖速度最快,至32 h病毒感染滴度达到最高.荧光定量RT-PCR结果显示,PHEV感染可诱导J774A.1细胞分泌的TNF-a、IL-6、IL-Iβ mRNA转录水平均显著升高,尤其IL-6 mRNA的表达量显著增加,在48 h达到对照组的25倍;TNF-αmRNA的表达量在感染后8h内增加为对照组的4倍,随后一直维持较高水平.ELISA结果显示,TNF-a、IL-6、IL-1β蛋白水平表达也显著增加.上述研究结果表明,PHEV不仅可以感染J774A.1细胞,而且能诱导其分泌多种细胞因子参与免疫应答,为进一步阐明机体重要免疫细胞在PHEV过程中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺文琦	吉林大学动物医学学院	70	253	8.0	12.0
2	高丰	吉林大学动物医学学院	88	276	9.0	12.0
3	唐博	吉林大学动物医学学院	28	83	4.0	7.0
4	潘伟	吉林大学动物医学学院	19	87	6.0	9.0
5	张竞	吉林大学动物医学学院	9	11	2.0	2.0
6	田忠华		8	6	2.0	2.0
7	兰云刚	吉林大学动物医学学院	13	20	3.0	3.0