旋毛虫果糖-1,6-二磷酸酶基因的克隆表达及生物学特性分析

• 作者: 严若峰 宋小凯 张萌萌 徐立新 李祥瑞
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 旋毛虫 果糖-1,6-二磷酸酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: S852.73+1
• 字数: 3703字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank公布的旋毛虫果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)基因序列,设计1对特异性引物,以旋毛虫总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增出1条约为1kb的DNA片段.测序结果表明该片段包含FBP的完整ORF,长1 026 bp,编码341个氨基酸.BLAST分析发现其核酸和氨基酸序列与已知旋毛虫FBP的基因和氨基酸序列的相似性分别为99％和100％.将该ORF亚克隆到pET-32a(+)载体中,酶切鉴定正确后转化感受态大肠杆菌BI21 (DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,结果表明该融合蛋白大小为55.4 ku,重组蛋白主要以包涵体的形式表达.Westemblot结果显示该重组蛋白能被旋毛虫感染小鼠血清识别.对纯化、复性的重组蛋白进行了酶活性测定,结果发现该重组酶的最适pH为7.0,最适温度为37℃.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李祥瑞	南京农业大学动物医学院	126	1418	20.0	33.0
2	徐立新	南京农业大学动物医学院	57	304	11.0	14.0
3	严若峰	南京农业大学动物医学院	53	256	10.0	13.0
4	宋小凯	南京农业大学动物医学院	32	84	6.0	8.0
5	张萌萌	南京农业大学动物医学院	4	9	2.0	2.0