小反刍兽疫病毒与产气荚膜梭菌双重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘吉山 唐娜 孙翠平 张倩 李书光 王玉茂 苗立中 谢金文 贾锐
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 羊 小反刍兽疫病毒 产气荚膜梭菌 双重PCR 鉴别诊断
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 9-13
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659
• 字数: 4369字
• 语种: 中文

摘要

为实现小反刍兽疫病毒与产气荚膜梭菌的鉴别诊断,采用改良RNA/DNA提取试剂提取动物组织中的细菌DNA和病毒RNA,基于2014年流行的小反刍兽疫病毒N蛋白基因和产气荚膜梭菌α毒素编码基因序列分别设计合成特异性引物,建立双重PCR方法,优化反应条件,并分析方法的灵敏度与特异性.结果表明,所建立的双重PCR检测方法可以同步检测PPRV和产气荚膜梭菌,分别扩增出406 bp和272 bp大小特异性条带,方法特异性好,检测灵敏度能够分别达到0.001TCID50/mL和10个CFU/mL.