多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立

• 作者: 周玲玲 杨菊凤 林祥群 温青娜 申红
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 欧洲型 美洲型 高致病性 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5335字
• 语种: 中文

摘要

根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法.该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84％和1.76％;灵敏性试验表明其检测下限为10 copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因.该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨菊凤		16	53	4.0	7.0
2	温青娜		7	21	2.0	4.0
3	周玲玲		3	18	3.0	3.0