牛奶中无乳链球菌DNA提取方法的比较

• 作者: 吴福平 封莉 洪颖 王毅谦 祝长青 肖震 蒋原 蒋鲁岩 邵景东 郝俊虎 黄明
• 来源期刊: 食品安全质量检测学报
• 关键词: 牛奶 无乳链球菌 DNA提取 紫外分光光度计法 实时荧光PCR
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 本期专题：食源性致病微生物
• 页码范围: 4832-4838
• 页数: 7页
• 字数: 4702字
• 语种: 中文

摘要

目的：以牛奶中的致病性无乳链球菌作为研究对象,对9种常用的细菌核酸提取方法进行比较。方法选用紫外分光光度计法和实时荧光PCR法对各方法进行系统评估。结果超声波处理结合天根吸附柱的方法能提取到得率较高、纯度较好的DNA,结合实时荧光PCR法后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度能达到90 cfu；天根吸附柱法提取所得 DNA 得率稍低,结合实时荧光 PCR 法后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度也能达到90 cfu；溶菌酶法和超声波破碎提取法用于实时荧光PCR后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度能达到350 cfu； Chelex-100法更适于纯菌的检测,该法结合实时荧光PCR法对无乳链球菌的检测灵敏度能达到350 cfu的灵敏度。结论应根据样品类型、方法要求和检测成本来选择适合的核酸提取方法。