大黄酸通过MAPK信号转导通路诱导HK-2细胞凋亡

• 作者: 于锋 孙浩 杨加培 毛勇 王丹丹
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大黄酸 HK-2细胞 细胞凋亡 丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路 c-jun氨基末端激酶 p38丝裂原活化蛋白激酶
• 年，卷（期）: 2015,（15）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 147-151
• 页数: 5页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.2015150147

摘要

目的:研究大黄酸诱导人肾小管上皮细胞系HK-2细胞凋亡作用及其凋亡机制.方法:将密度为4×104个/mL的HK-2细胞悬液接种于96孔板,培养24 h后分别加入不同浓度大黄酸(0,25,50,100 μmol· L-1)作用12,24,48 h,MTT法检测大黄酸对HK-2细胞活性的抑制作用;利用Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测大黄酸诱导HK-2细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测细胞原癌基因c-jun,活化转录调控因子2(ATF-2),半胱天冬氨酸酶3(Caspase-3)基因表达水平;Western blotting检测细胞磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK),c-jun氨基末端激酶(JNK),磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和活化型半胱天冬氨酸酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白的变化,并利用JNK抑制剂SP600125,p38抑制剂SB203580进一步验证JNK和p38所介导的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在HK-2细胞凋亡中的作用.结果:大黄酸能够呈剂量依赖性和时间依赖性抑制HK-2细胞活性.大黄酸作用下HK-2细胞凋亡率明显增加.大黄酸作用于HK-2细胞c-jun,ATF-2及Caspase-3基因的mRNA均明显上调;p-p38,p-JNK及CleavedCaspase-3蛋白表达显著性增加,JNK和p38总蛋白表达无明显变化.JNK特异性抑制剂SP600125与p38特异性抑制剂SB203580均能显著降低大黄酸诱导的HK-2细胞的凋亡率.结论:大黄酸能够诱导HK-2细胞凋亡,其作用机制可能是通过影响MAPK信号转导通路实现的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于锋		158	1192	18.0	25.0
2	毛勇		2	32	1.0	2.0
3	杨加培		2	0	0.0	0.0
4	孙浩		3	0	0.0	0.0
5	王丹丹		7	37	3.0	6.0