CXCR4启动子的条件复制型腺病毒对肺癌细胞的靶向杀伤作用

• 作者: 张雅洁 李书华 李龙光 王红艳 谢晓斌 龙捷
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 条件复制型腺病毒 肿瘤特异性启动子 CXCR4启动子
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 1203-1208
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 字数: 4824字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.07.009

摘要

目的：构建CXCR4启动子的条件复制型腺病毒载体CRAd-CXCR4-GFP，探究CRAd-CXCR4-GFP对肺癌细胞的靶向杀伤效应。方法：PCR法扩增人CXCR4-E1A基因并克隆至穿梭质粒pDC316-GFP，将骨架质粒pBHG-lox-E1，3Cre和重组质粒pDC316-CXCR4-GFP共转染293细胞，产生重组腺病毒CRAd-CXCR4-GFP并扩增，扩增后进行PCR鉴定和腺病毒滴度测定；real-time PCR检测5种肺癌细胞株CXCR4的mRNA表达，筛选出表达最高的A549细胞；将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞，检测两者转染后CXCR4启动子活性和腺病毒复制数；将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞和16HBE细胞，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，CCK-8检测各组细胞活性。结果：成功构建重组质粒pDC316-CXCR4-GFP，与骨架质粒pBHG-lox-E1，3Cre共转染293细胞后第11天可见片状绿色荧光；PCR表明目的基因CXCR4-E1A已成功整合在重组腺病毒基因组中；测定重组腺病毒滴度为1×1013 PFU／L；CRAd-CXCR4-GFP转染A549细胞后E1A的mRNA和E4表达较Ad-NULL组明显上升；与Ad-NULL组和空白对照组相比，CRAd-CXCR4-GFP组前4 d A549细胞凋亡率和活性无明显差异，第5天细胞凋亡率明显增加，细胞活性明显降低，各组间5 d内16 HBE细胞的细胞凋亡率和细胞活性均无明显变化。结论：成功构建条件复制型腺病毒表达载体CRAd-CXCR4-GFP，该载体对肺癌细胞具有靶向杀伤作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李书华	广州医科大学病理学教研室	13	27	3.0	4.0
2	谢晓斌	广州医科大学病理学教研室	11	42	4.0	6.0
3	张雅洁	广州医科大学病理学教研室	24	90	6.0	8.0
4	龙捷	广州医科大学病理学教研室	10	34	4.0	4.0
5	李龙光	广州医科大学病理学教研室	2	0	0.0	0.0
6	王红艳	广州医科大学病理学教研室	14	36	3.0	5.0