大肠杆菌不耐热肠毒素LTB大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体的构建及表达

• 作者: 刘琼 尚晓敏 李桂玲 李皓 王春凤
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 大肠杆菌 不耐热肠毒素LTB 乳酸菌 表达载体 构建 表达
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 184-186
• 页数: 3页
• 分类号: S852.61+2
• 语种: 中文

摘要

为了获取大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因,试验以产肠毒素大肠杆菌的大质粒为模板,采用PCR技术扩增大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因,并将PCR产物克隆至pMD18-T载体中构建克隆质粒pMD18T-LTB;通过酶切、纯化将LTB基因与大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pW425et连接构建成重组质粒pW425et-LTB,将pW425et-LTB转化至thy A基因缺陷型大肠杆菌X13感受态细胞中,再进行SDS-PAGE、Western-blot检测.结果表明:重组大肠杆菌表达出LTB蛋白,且表达的融合蛋白能被LTB特异性抗体识别.