CPSIT_0942在鹦鹉热嗜衣原体感染细胞中的定位和特性研究

• 作者: 伍海英 刘卓然 吴移谋
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鹦鹉热嗜衣原体 假定蛋白CPSIT_0942 包涵体蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（14）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2268-2271
• 页数: 4页
• 分类号: R374+.2
• 语种: 中文

摘要

目的 确定假定蛋白CPSIT_0942在鹦鹉热嗜衣原体(Cps)感染细胞中的定位及特征.方法 采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增Cps cpsit_0942基因,克隆入pGEX-6p-1原核表达载体,转化至大肠杆菌E.coli BI21,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CPSIT_0942,纯化后免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光(indirect immunoinfluscent assay,IFA)检测CPSIT_0942蛋白在细胞内的定位,ELISA检测其在体外诱导THP-1细胞表达炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的情况.结果 CPSIT_0942蛋白能得到可溶性表达蛋白,可诱导机体产生抗体,IFA主要定位于Cps包涵体,该蛋白体外能诱导THP-1细胞产生炎症因子,在4 μg/ml的浓度时,GST-CPSIT_0942诱导产生的IL-1β、IL-6和TNF-α达到最大值,且当以4 μg,/ml蛋白刺激细胞12 h时,IL-1β、IL-6和TNF-α达到高峰.结论 CPSIT_0942主要定位于包涵体上,能诱导THP-1细胞产生炎症因子,为阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据.